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ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因

更新時(shí)間:2021-07-28      瀏覽次數:1574


仁捷生物ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因,小編幫您找一下原因:
以下幾點(diǎn),請注意看哦

問(wèn)題

序號

可能原因

解決方法

顯色淡,靈敏度偏低

1

 試劑盒未充分平衡

試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)

2

 樣品不適合做ELISA檢測

樣品一般選擇培養上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件(例如稀釋液的成分)

3

 酶標板在貯存或洗后拍干時(shí)過(guò)分干燥

防止板過(guò)于干燥

4

 包被抗體遭到破壞

操作溫和,移液槍不能碰到孔底

5

 樣本和抗體孵育條件不合適

按照說(shuō)明書(shū)條件,建議孵育過(guò)程中全程振蕩孵育。

6

 洗滌浸泡時(shí)間過(guò)長(cháng)

按照說(shuō)明書(shū)操作。勿人為增加浸泡時(shí)間;

7

 偶聯(lián)HRP試劑污染

棄去試劑,重新配置

8

 錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑

棄去試劑,重新配置

9

 TMB底物孵育時(shí)間過(guò)短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時(shí)間

確定合適的孵育時(shí)間:人為判定-最高濃度的標準品出現深藍色;S4-5有淡藍色;機器判定620 nm波長(cháng)下測定OD值達到0.6-0.65

10

 樣本濃度過(guò)高或存在基質(zhì)效應

建議做不同稀釋倍數,確認樣本最佳稀釋倍數。

11

 酶標儀濾光片設置有問(wèn)題或者波長(cháng)選擇不對

確認儀器設置及選擇正確的波長(cháng)檢測。

12

 酶標板不適合做ELISA

不能使用細胞培養板,建議使用ELISA專(zhuān)用高吸附力板子。


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